全自动毛细管电泳核酸分析仪

什么是全自动毛细管电泳核酸分析仪？将样品进样至填充筛分聚合物的毛细管，并逐样品报告片段长度、摩尔浓度和完整性数值的仪器。用于测序文库检查和扩增子质量控制。## 概述

毛细管分析仪使样品通过电动方式进入填充线性筛分聚合物的毛细管，按大小分离片段并用激光诱导荧光检测，检测方式可为聚合物中的嵌入染料或荧光标记样品。通常 8 至 96 根毛细管并行运行，每个样品均对照内标分子量标记进行片段长度判定，因此结果不受批次差异影响。输出包括电泳图、含片段长度和摩尔浓度的片段表，以及 RNA 完整性数值或文库片段分布等衍生指标。典型分辨率为片段长度的 2% 至 5%，灵敏度达每微升数皮克。进样、分离、聚合物补充和清洗均自动完成，可减少人工并使不同操作者的结果具有可比性。## 工作原理是什么？主要有两类测量原理。吸光度分析使用 1 mm 或 0.5 mm 光程的微量比色池，在核酸强烈吸收的 260 nm 处读数，并将结果换算为标准 10 mm 光程。A260 为 1.0 约相当于双链 DNA 50 µg/mL、单链 DNA 33 µg/mL 和 RNA 40 µg/mL，260/280 与 260/230 比值可指示蛋白质或盐类污染。荧光法使用与双链 DNA 或总 RNA 特异性结合的染料，信号仅来自目标分子，因此对蛋白质、盐类和游离核苷酸的耐受性更好。毛细管电泳在筛分聚合物中分离片段，给出以碱基对表示的片段长度和摩尔浓度。自动工作站将测量与移液结合，可将样品稀释至目标浓度。## 主要特点有哪些？- 8 至 96 根毛细管并行运行。- 内标分子量标记判定片段长度，结果不受批次影响。- 激光诱导荧光检测，可用嵌入染料或标记样品。- 一份报告包含摩尔浓度、片段长度和完整性指标。- 自动补充聚合物和清洗毛细管。- 分辨率为片段长度的 2% 至 5%。## 技术参数有哪些？典型的全自动毛细管电泳核酸分析仪配置：毛细管数量为 8-96；片段范围为 35 bp to 20 kb depending on assay；分辨率为 2-5 percent of fragment length；灵敏度为 A few pg/µL；每板运行时间为 20-90 min for 96 samples；检测方式为 Laser-induced fluorescence, 2-5 channels。以上数值代表该产品类别的常见水平，具体配置参数以报价单及随机校准文件为准。## 适用于哪些应用？全自动毛细管电泳核酸分析仪主要用于测序文库插入片段长度和摩尔浓度检查、RNA 完整性评估、扩增子组合质量控制、基因分型片段分析。在更广泛的核酸分析类别中，实验室还将其用于二代测序文库质量控制、qPCR 前模板定量、质粒和寡核苷酸质量检查。## 适用哪些标准与认证？相关标准与方法包括 ISO 20395、ISO 13485 manufacturing、MIQE guidelines、CLSI MM06-A2、IEC 61010-1、IVDR (EU) 2017/746。本型号的认证候选包括 CE、ISO 13485 manufacturing、IEC 61010-1 test report；每项认证均需针对具体配置在发货前确认，仅提供已实际签发的证书。应使用与样品相同的缓冲液进行空白校准，因为不同缓冲液的吸光度不同，含胍盐或 EDTA 的洗脱液会给出误导性比值。保持测量基座清洁，并在样品之间擦拭以避免残留，同时定期用参考标准品检查微量测量的准确性。荧光检测需要新鲜配制的标准品，染料试剂需避光，且基于染料的浓度值取决于检测化学体系，因此不应比较不同试剂盒的结果。进行片段分析时，应严格按供应商要求制备样品和分子量标记，因为离子强度会影响进样。洗脱后的核酸应低温保存，避免反复冻融，并为每份样品记录浓度、比值和检测方法。## 如何选择合适的全自动毛细管电泳核酸分析仪？当需要以高通量客观测定片段长度和完整性时（如测序中心），选择毛细管分析仪。将毛细管数量、片段范围、分辨率和灵敏度与检测需求比较，并核算单样品耗材成本，包括聚合物、毛细管和标记试剂盒。确认导出数据可接入文库追踪系统。### 与其他核酸分析型号相比如何？根据所需的选择性选择方法。吸光度法快速、成本低，足以满足常规质粒或 PCR 检查，但无法区分 DNA 与 RNA，且受蛋白质、酚类和盐类影响。荧光染料对双链 DNA 或 RNA 具有选择性，最低可检测数皮克，适合测序文库和产量很低的样品。毛细管电泳可提供分光光度计无法给出的片段大小和完整性信息，对文库插入片段大小和 RNA 完整性尤为重要。随后由通量决定在单管设备、微孔板读数仪和兼具测量与均一化功能的自动工作站之间选择。检查最小样品体积、检测限、线性范围、所需标准品以及数据系统可接受的导出格式。