微量紫外核酸分析仪

什么是微量紫外核酸分析仪？在基座上测量 1 至 2 µL 样品、读取 260、280 和 230 nm 的分光光度计，数秒内给出浓度和纯度比值。是质粒和 PCR 模板检查的常规仪器。## 概述

微量分析仪用基座和可移动臂形成 0.5 至 1 mm 的液柱，因此仅需 1 至 2 µL 样品且无需比色皿。氙闪灯或 LED 光源覆盖 190 至 850 nm，CCD 或光电二极管阵列检测器读取全谱，软件据此进行光程校正，并自动以相当于 10 mm 比色皿的结果表示。220 至 350 nm 全谱扫描可显示污染峰，内置算法可检测气泡或样品量不足并提示重测。典型性能包括双链 DNA 检测限约 2 ng/µL、线性范围可达约 15,000 ng/µL、重复性在 2% 以内。体积小且无耗材，使其成为多数分子实验室的首选工具。## 工作原理是什么？主要有两类测量原理。吸光度分析使用 1 mm 或 0.5 mm 光程的微量比色池，在核酸强烈吸收的 260 nm 处读数，并将结果换算为标准 10 mm 光程。A260 为 1.0 约相当于双链 DNA 50 µg/mL、单链 DNA 33 µg/mL 和 RNA 40 µg/mL，260/280 与 260/230 比值可指示蛋白质或盐类污染。荧光法使用与双链 DNA 或总 RNA 特异性结合的染料，信号仅来自目标分子，因此对蛋白质、盐类和游离核苷酸的耐受性更好。毛细管电泳在筛分聚合物中分离片段，给出以碱基对表示的片段长度和摩尔浓度。自动工作站将测量与移液结合，可将样品稀释至目标浓度。## 主要特点有哪些？- 基座测量，样品量 1 至 2 µL。- 光程 0.5 至 1 mm，自动换算为 10 mm。- 190 至 850 nm 全谱扫描。- 双链 DNA 检测限约 2 ng/µL。- 气泡和样品量不足检测并提示重测。- 无需比色皿或其他耗材。## 技术参数有哪些？典型的微量紫外核酸分析仪配置：波长范围为 190-850 nm；样品体积为 1-2 µL；光程为 0.5-1 mm, corrected to 10 mm；检测限为 About 2 ng/µL dsDNA；线性上限为 15,000 ng/µL dsDNA；重复性为 Within 2 percent。以上数值代表该产品类别的常见水平，具体配置参数以报价单及随机校准文件为准。## 适用于哪些应用？微量紫外核酸分析仪主要用于质粒和基因组 DNA 定量、PCR 和 qPCR 模板检查、RNA 浓度测定、寡核苷酸浓度检查。在更广泛的核酸分析类别中，实验室还将其用于二代测序文库质量控制、qPCR 前模板定量、质粒和寡核苷酸质量检查。## 适用哪些标准与认证？相关标准与方法包括 ISO 20395、ISO 13485 manufacturing、MIQE guidelines、CLSI MM06-A2、IEC 61010-1、IVDR (EU) 2017/746。本型号的认证候选包括 CE、ISO 9001 manufacturing、IEC 61010-1 test report；每项认证均需针对具体配置在发货前确认，仅提供已实际签发的证书。应使用与样品相同的缓冲液进行空白校准，因为不同缓冲液的吸光度不同，含胍盐或 EDTA 的洗脱液会给出误导性比值。保持测量基座清洁，并在样品之间擦拭以避免残留，同时定期用参考标准品检查微量测量的准确性。荧光检测需要新鲜配制的标准品，染料试剂需避光，且基于染料的浓度值取决于检测化学体系，因此不应比较不同试剂盒的结果。进行片段分析时，应严格按供应商要求制备样品和分子量标记，因为离子强度会影响进样。洗脱后的核酸应低温保存，避免反复冻融，并为每份样品记录浓度、比值和检测方法。## 如何选择合适的微量紫外核酸分析仪？当速度和单样品低成本比双链 DNA 选择性更重要时，选择微量分析仪用于常规定量。将波长范围、检测限和线性上限与样品类型比较，并检查是否需要比色皿模式测量高浓度样品。确认基座清洁流程和再校准周期。### 与其他核酸分析型号相比如何？根据所需的选择性选择方法。吸光度法快速、成本低，足以满足常规质粒或 PCR 检查，但无法区分 DNA 与 RNA，且受蛋白质、酚类和盐类影响。荧光染料对双链 DNA 或 RNA 具有选择性，最低可检测数皮克，适合测序文库和产量很低的样品。毛细管电泳可提供分光光度计无法给出的片段大小和完整性信息，对文库插入片段大小和 RNA 完整性尤为重要。随后由通量决定在单管设备、微孔板读数仪和兼具测量与均一化功能的自动工作站之间选择。检查最小样品体积、检测限、线性范围、所需标准品以及数据系统可接受的导出格式。