化学发光凝胶成像系统

什么是化学发光凝胶成像系统？配深制冷相机和大光圈镜头的暗箱成像仪，直接记录化学发光 Western blot 发出的光，无需激发光源。适用于高灵敏度蛋白质检测。## 概述

化学发光系统不需要照明光路，因为印迹膜由酶促反应发光，通常为辣根过氧化物酶与鲁米诺底物体系。因此灵敏度取决于尽可能多地收集光：镜头光圈 f/0.95 至 f/1.4，相机制冷至 -30 至 -60 °C 以降低暗电流，曝光时间从数秒到 30 分钟。像素合并可提高灵敏度但降低分辨率，软件可采集一系列曝光，使弱带和强带都处于线性范围内。部分仪器增加 LED 或紫外光源以支持显色和荧光模式，成为多用途设备。底物的均匀施加、各膜之间时间的一致性以及平整的膜面是获得可重复定量结果的关键。## 工作原理是什么？凝胶成像将染色或标记的凝胶转换为数字图像。光源激发样品，既可从下方经透射台照射，也可从上方反射照明，发射滤光片阻挡激发波长，使只有荧光信号到达相机。302 nm 紫外可激发溴化乙锭等染料，约 470 nm 的蓝光 LED 激发 SYBR 类染料，化学发光则无需激发，因为印迹膜本身发光。定焦或电动镜头将图像投射到制冷 CCD 或 sCMOS 传感器上，长曝光累积信号而制冷限制暗电流。软件控制曝光、像素合并和滤光片选择，显示 16 位图像，并可测量条带强度、对照分子量标记计算分子量以及进行荧光定量（光密度分析）。## 主要特点有哪些？- 无需激发光源，仅记录发射光。- 相机深度制冷至 -30 至 -60 °C，降低暗电流。- 大光圈镜头 f/0.95 至 f/1.4，提高收光能力。- 曝光序列从数秒到 30 分钟。- 可选像素合并以提高灵敏度。- 可选显色和荧光成像模式。## 技术参数有哪些？典型的化学发光凝胶成像系统配置：检测模式为 Chemiluminescence, no excitation；相机类型为 Cooled CCD or sCMOS；相机制冷为 -30 to -60 °C；位深为 16 bit；镜头光圈为 f/0.95-1.4 fixed or motorized；曝光范围为 1 s to 30 min。以上数值代表该产品类别的常见水平，具体配置参数以报价单及随机校准文件为准。## 适用于哪些应用？化学发光凝胶成像系统主要用于 Western blot 化学发光检测、蛋白表达比较、免疫共沉淀印迹分析、低丰度蛋白的灵敏检测。在更广泛的凝胶成像系统类别中，实验室还将其用于电泳后琼脂糖凝胶成像、Western blot 化学发光成像、多色荧光凝胶成像记录。## 适用哪些标准与认证？相关标准与方法包括 IEC 61010-1、IEC 61010-2-081、IEC 62471、IEC 61326-1、ISO 13485 manufacturing。本型号的认证候选包括 CE、ISO 9001 manufacturing、IEC 61010-1 test report；每项认证均需针对具体配置在发货前确认，仅提供已实际签发的证书。系统应远离强环境光和振动，曝光期间保持暗箱关闭。定期检查并清洁紫外透射台滤光片，因为划痕和污渍会散射光线并降低对比度。防止相机镜头和发射滤光片积尘和指纹，滤光片应存放于专用盒中。按固定周期用辐照计检查紫外强度，按额定小时数更换灯管，并在每次维护时验证联锁。同一项目内应使用一致的曝光和光圈设置，使强度可比，并将成像参数随文件一并保存。确保使用者遵守紫外暴露、手套和染料废液处置的当地规定。## 如何选择合适的化学发光凝胶成像系统？对于化学发光印迹，尤其是目标蛋白丰度较低时，选择该机型。比较相机制冷、量子效率、镜头光圈和像素合并选项，这些决定检测下限。检查软件是否提供饱和提示并支持曝光序列采集，同时确认暗箱在长曝光下完全避光。### 与其他凝胶成像系统型号相比如何？应根据检测化学体系选择：溴化乙锭及类似染料使用紫外透射，较安全的替代染料使用蓝光 LED，多重标记使用多色荧光。化学发光检测需要配深制冷相机的暗箱系统但不需要光源。灵敏度主要取决于相机量子效率、制冷温度和镜头光圈，因此应在比较分辨率之前先比较这些参数。检查提供的激发波长和发射滤光片、透射台是 302 nm、365 nm 还是双波长，以及镜头覆盖的凝胶面积。确认条带检测、基于分子量标记的片段长度计算、光密度分析和导出等软件功能，并核实紫外防护和联锁以确保操作者安全。