多色荧光凝胶成像系统

什么是多色荧光凝胶成像系统？配多种 LED 激发波长和发射滤光轮的成像仪，可在同一凝胶或印迹膜上采集多重荧光信号，支持二至四色检测和定量比较。## 概述

多色荧光系统增加蓝、绿、红和近红外波长的反射照明 LED 以及电动滤光轮，因此同一膜或凝胶可在多个通道成像，无需剥离和重新孵育。由于每个通道单独记录并在软件中合成，多重靶标可相互相对定量，光谱分离度高的染料可减少串扰。相机为制冷 CCD 或 sCMOS，输出 12 至 16 位，长曝光支持微弱信号。部分仪器增加紫外透射用于嵌入染料，并配白光用于显色检测，成为通用成像仪。软件提供通道采集序列、平场校正、通道叠加、分子量校准和归一化定量，适合多重 Western blot、荧光凝胶和双向电泳凝胶。## 工作原理是什么？凝胶成像将染色或标记的凝胶转换为数字图像。光源激发样品，既可从下方经透射台照射，也可从上方反射照明，发射滤光片阻挡激发波长，使只有荧光信号到达相机。302 nm 紫外可激发溴化乙锭等染料，约 470 nm 的蓝光 LED 激发 SYBR 类染料，化学发光则无需激发，因为印迹膜本身发光。定焦或电动镜头将图像投射到制冷 CCD 或 sCMOS 传感器上，长曝光累积信号而制冷限制暗电流。软件控制曝光、像素合并和滤光片选择，显示 16 位图像，并可测量条带强度、对照分子量标记计算分子量以及进行荧光定量（光密度分析）。## 主要特点有哪些？- 蓝、绿、红和近红外 LED 反射照明。- 电动发射滤光轮选择通道。- 二至四色多重采集，无需重新孵育。- 制冷 CCD 或 sCMOS 相机，12 至 16 位输出。- 可选紫外透射和白光照明。- 软件支持通道叠加、校准和归一化定量。## 技术参数有哪些？典型的多色荧光凝胶成像系统配置：激发波长为 470, 520, 620, 680, 785 nm options；发射滤光轮为 4-8 positions, motorized；荧光通道为 2-4 simultaneous in software；相机类型为 Cooled CCD or sCMOS；位深为 12-16 bit；相机制冷为 -20 to -60 °C。以上数值代表该产品类别的常见水平，具体配置参数以报价单及随机校准文件为准。## 适用于哪些应用？多色荧光凝胶成像系统主要用于多重 Western blot 成像、双色荧光凝胶分析、近红外蛋白质定量、双向电泳凝胶成像记录。在更广泛的凝胶成像系统类别中，实验室还将其用于电泳后琼脂糖凝胶成像、Western blot 化学发光成像、多色荧光凝胶成像记录。## 适用哪些标准与认证？相关标准与方法包括 IEC 61010-1、IEC 61010-2-081、IEC 62471、IEC 61326-1、ISO 13485 manufacturing。本型号的认证候选包括 CE、ISO 9001 manufacturing、IEC 61010-1 test report；每项认证均需针对具体配置在发货前确认，仅提供已实际签发的证书。系统应远离强环境光和振动，曝光期间保持暗箱关闭。定期检查并清洁紫外透射台滤光片，因为划痕和污渍会散射光线并降低对比度。防止相机镜头和发射滤光片积尘和指纹，滤光片应存放于专用盒中。按固定周期用辐照计检查紫外强度，按额定小时数更换灯管，并在每次维护时验证联锁。同一项目内应使用一致的曝光和光圈设置，使强度可比，并将成像参数随文件一并保存。确保使用者遵守紫外暴露、手套和染料废液处置的当地规定。## 如何选择合适的多色荧光凝胶成像系统？当需要在同一样品上测量多种荧光标记（尤其是背景较低的红外印迹）时，选择该机型。使激发和发射选项匹配所用染料组合，确认滤光片位数并检查相机制冷能力以获得弱信号。索取平场校正和归一化工具，因为多重定量依赖这些功能。### 与其他凝胶成像系统型号相比如何？应根据检测化学体系选择：溴化乙锭及类似染料使用紫外透射，较安全的替代染料使用蓝光 LED，多重标记使用多色荧光。化学发光检测需要配深制冷相机的暗箱系统但不需要光源。灵敏度主要取决于相机量子效率、制冷温度和镜头光圈，因此应在比较分辨率之前先比较这些参数。检查提供的激发波长和发射滤光片、透射台是 302 nm、365 nm 还是双波长，以及镜头覆盖的凝胶面积。确认条带检测、基于分子量标记的片段长度计算、光密度分析和导出等软件功能，并核实紫外防护和联锁以确保操作者安全。