电泳仪

电泳仪的工作原理是什么？电泳时，电场驱动带电分子通过凝胶基质：核酸因磷酸骨架带负电而向阳极迁移，其大小和构象决定穿过孔隙的速度。0.5% 至 2% 的琼脂糖凝胶可分离约 100 bp 至 20 kb 的片段，TAE 或 TBE 等缓冲液在电极间传导电流。电压按凝胶长度设定，通常为 5 至 10 V/cm，因为电压越高运行越快但会使凝胶发热并使条带模糊。上样染料增加密度并含指示染料，分子量标记通过比对给出片段长度。检测使用紫外或蓝光下的嵌入染料，芯片系统则使用荧光标记。变性尿素-PAGE 可分辨短寡核苷酸中的单碱基差异。## 电泳仪有哪些型号？- 带机上成像的自动琼脂糖凝胶电泳系统：集上样、电泳分离和图像采集于一体的仪器，使用预制琼脂糖凝胶且无需人工处理凝胶。- 多通道琼脂糖凝胶电泳系统：带多个独立泳道、托盘或子槽的卧式电泳槽，可让多位使用者或多种方案同时运行。- 微流控芯片电泳系统：在微流控芯片内分离荧光标记核酸片段并给出数字片段长度和浓度的台式分析仪，用于测序文库质控和片段分析。- 可编程电泳电源：向一台或多台电泳槽提供恒压、恒流或恒功率输出的稳压电源，具有定时程序和安全限值。- 寡核苷酸分析用变性尿素-PAGE 系统：配加热板和尿素变性凝胶的垂直电泳系统，可分辨相差一个碱基的短单链核酸，用于寡核苷酸质量控制和微小 RNA 分析。## 如何选择合适的型号？使方法与分子种类和所需分辨率相匹配。卧式槽琼脂糖电泳是双链 DNA 片段和 PCR 产物的标准方法，变性尿素-PAGE 用于寡核苷酸和单链片段，筛分聚合物芯片系统用于多样品的准确片段长度测定和定量。随后由通量决定在手动槽、多通道设备和集电泳与成像于一体的自动系统之间选择。考虑凝胶规格和加样孔数量、缓冲液体积和冷却方式以及检测方法，因为染料、紫外照射和荧光光学部件在灵敏度和安全性上各不相同。对于电源，检查电压、电流和功率限值、可编程性以及是否支持恒压、恒流或恒功率模式。## 电泳仪用于哪些领域？电泳仪广泛用于 PCR 产物验证、DNA 片段长度测定和酶切图谱分析、二代测序文库质量控制、寡核苷酸纯度分析、教学和方法开发。## 适用哪些标准与认证？电泳仪相关工作通常依据 IEC 61010-1、IEC 61010-2-081、IEC 61326-1、ISO 13485 manufacturing、CLSI MM13-A。CE 等仪器认证需按具体配置逐项确认，不作默认承诺。## 采购前需要考虑哪些要点？应在专用区域制备凝胶，并在水平台面上灌注。使用按推荐比例新鲜配制的缓冲液，因为重复使用会改变 pH 和电导率，同时检查电极丝和接头是否清洁。运行时应盖好电泳槽，以减少蒸发并保护操作者免受紫外或电击危险，运行期间切勿接触缓冲液或电极。尽量选用低毒染料，并按当地规定处理溴化乙锭或其他嵌入剂。每次运行后清洁并冲洗电泳槽，去除染料残留和琼脂糖。按固定周期检查电源校准，并检查凝胶托盘裂纹、导线老化和盖联锁松动。