微流控芯片电泳系统

什么是微流控芯片电泳系统？在微流控芯片内分离荧光标记核酸片段并给出数字片段长度和浓度的台式分析仪，用于测序文库质控和片段分析。## 概述

芯片电泳系统用填充筛分聚合物的微通道网络替代凝胶。样品加入孔中，通过电动方式移至进样交叉点并按大小分离，片段经过固定检测点时由激光诱导荧光检测。由于分离通道短且电压高，运行可在 1 至 5 分钟内完成，软件根据分子量标记将迁移时间换算为片段长度，并对峰面积积分得到浓度。芯片可容纳 12 或 16 份样品，通常另设标记孔，每次运行消耗一套含凝胶、标记和调节液的试剂包。灵敏度可达每微升数皮克，对数百碱基对片段的分离度约为 5% 至 10%。## 工作原理是什么？电泳时，电场驱动带电分子通过凝胶基质：核酸因磷酸骨架带负电而向阳极迁移，其大小和构象决定穿过孔隙的速度。0.5% 至 2% 的琼脂糖凝胶可分离约 100 bp 至 20 kb 的片段，TAE 或 TBE 等缓冲液在电极间传导电流。电压按凝胶长度设定，通常为 5 至 10 V/cm，因为电压越高运行越快但会使凝胶发热并使条带模糊。上样染料增加密度并含指示染料，分子量标记通过比对给出片段长度。检测使用紫外或蓝光下的嵌入染料，芯片系统则使用荧光标记。变性尿素-PAGE 可分辨短寡核苷酸中的单碱基差异。## 主要特点有哪些？- 一次性芯片内微通道分离。- 激光诱导荧光检测。- 每张芯片运行 1 至 5 分钟。- 通过峰积分给出数字化片段长度和浓度。- 灵敏度达每微升数皮克。- 每张芯片 12 或 16 份样品，另含标记孔。## 技术参数有哪些？典型的微流控芯片电泳系统配置：样品通量为 12 or 16 per chip；样品体积为 1-2 µL per well；检测片段范围为 35 bp to 10 kb depending on assay；分辨率为 5-10 percent for fragments of 200-1,000 bp；灵敏度为 A few pg/µL of DNA；运行时间为 1-5 min per chip。以上数值代表该产品类别的常见水平，具体配置参数以报价单及随机校准文件为准。## 适用于哪些应用？微流控芯片电泳系统主要用于二代测序文库片段长度测定、PCR 扩增子片段分析、限制性酶切片段测定、使用专用试剂盒进行 RNA 完整性评估。在更广泛的电泳仪类别中，实验室还将其用于 PCR 产物验证、DNA 片段长度测定和酶切图谱分析、二代测序文库质量控制。## 适用哪些标准与认证？相关标准与方法包括 IEC 61010-1、IEC 61010-2-081、IEC 61326-1、ISO 13485 manufacturing、CLSI MM13-A。本型号的认证候选包括 CE、ISO 9001 manufacturing、IEC 61010-1 test report；每项认证均需针对具体配置在发货前确认，仅提供已实际签发的证书。应在专用区域制备凝胶，并在水平台面上灌注。使用按推荐比例新鲜配制的缓冲液，因为重复使用会改变 pH 和电导率，同时检查电极丝和接头是否清洁。运行时应盖好电泳槽，以减少蒸发并保护操作者免受紫外或电击危险，运行期间切勿接触缓冲液或电极。尽量选用低毒染料，并按当地规定处理溴化乙锭或其他嵌入剂。每次运行后清洁并冲洗电泳槽，去除染料残留和琼脂糖。按固定周期检查电源校准，并检查凝胶托盘裂纹、导线老化和盖联锁松动。## 如何选择合适的微流控芯片电泳系统？当需要准确测定和定量大量片段且手动凝胶耗时过多时，选择芯片系统。比较所需检测的片段范围与分辨率、每张芯片的通量、单样品试剂成本以及分析软件的输出内容。确认检测试剂盒适合您的片段类型，并确认芯片可在现有条件下储存。### 与其他电泳仪型号相比如何？使方法与分子种类和所需分辨率相匹配。卧式槽琼脂糖电泳是双链 DNA 片段和 PCR 产物的标准方法，变性尿素-PAGE 用于寡核苷酸和单链片段，筛分聚合物芯片系统用于多样品的准确片段长度测定和定量。随后由通量决定在手动槽、多通道设备和集电泳与成像于一体的自动系统之间选择。考虑凝胶规格和加样孔数量、缓冲液体积和冷却方式以及检测方法，因为染料、紫外照射和荧光光学部件在灵敏度和安全性上各不相同。对于电源，检查电压、电流和功率限值、可编程性以及是否支持恒压、恒流或恒功率模式。