质量导向纯化液质联用系统

什么是质量导向纯化液质联用系统？质量导向纯化 LC-MS 由制备或半制备 LC、分流器、单四极杆检测器和按目标质量触发的馏分收集器组成，可从混合物中分离毫克至克级合成化合物、天然产物和杂质，而不仅依赖 UV 检测。## 概述

质量导向纯化将制备色谱与质量检测结合。高流量泵（常为 5 至 100 mL/min）驱动制备柱，主动或被动分流器将约千分之一或更少的流出液经补充泵送至质量检测器。当检测器在阈值以上看到目标 m/z 时，馏分收集器切换收集正在流出的峰，延迟体积补偿确保峰到达正确的收集管。这使得即使 UV 吸收杂质共流出，也可从复杂反应混合物或天然提取物中分离目标产物。系统通常包括大定量环或样品进样泵的进样器、UV-PDA 检测器以及可容纳数百支试管的堆叠式或架式收集器。运行后的蒸发和化合物重新分装通常另行处理。馏分按质量而非身份触发，因此仍需通过 NMR 进行确认。## 工作原理是什么？LC-MS 中，高压泵使流动相通过色谱柱（通常为 C18），分析物根据与固定相的亲和力分离。流出液通常为 0.2 至 1 mL/min，进入大气压离子源。电喷雾电离对雾化液流施加 3 至 5 kV 电压，使带电液滴收缩并释放气相离子，而大气压化学电离利用电晕放电处理极性较低的化合物。离子经毛细管或锥孔以及离子导向装置，依次进入压力更低的区域，再进入质量分析器。四极杆、离子阱、飞行时间或混合型分析器随后测量 m/z。流动相必须具有挥发性，例如甲酸、乙酸或甲酸铵，因为不挥发缓冲盐会污染离子源。## 主要特点有哪些？- 质量触发馏分收集并带延迟体积补偿，准确捕获峰 - 主动或被动分流器，将小部分流出液与补充溶剂一同送入 MS - 制备泵覆盖 5 至 100 mL/min，梯度精度 ±1% - 大体积进样器或样品进样泵，定量环 0.5 至 10 mL - 分析到制备放大软件，可计算上样量并转换梯度 - 架式馏分收集器，可无人值守处理 100 至 300 支试管或板

技术参数有哪些？典型的质量导向纯化液质联用系统配置：制备流速为 5–100 mL/min；最高压力为 400 bar (6000 psi)；梯度准确度为 ±1%；MS 质量范围为 m/z 50–2000；MS 分辨率为 Unit (0.7 u FWHM)；进入 MS 的分流比为 ~1:1000 to 1:10000 (adjustable)。以上数值代表该产品类别的常见水平，具体配置参数以报价单及随机校准文件为准。## 适用于哪些应用？质量导向纯化液质联用系统主要用于合成化合物库的纯化、从提取物中分离天然产物、用于结构解析的杂质分离、肽和寡核苷酸的纯化、参考标准品制备。在更广泛的液相色谱质谱联用仪类别中，实验室还将其用于药物杂质谱分析和代谢物鉴定、血浆和尿液中药物的生物分析、农药和兽药残留检测。## 适用哪些标准与认证？相关标准与方法包括 EPA Method 1633、EPA Method 537.1、EPA Method 533、USP <621> Chromatography、FDA Bioanalytical Method Validation Guidance、ICH M10 Bioanalytical Method Validation、EN 15662、CLSI C62-A、ISO/IEC 17025、IEC 61010-1。本型号的认证候选包括 CE、ISO 9001 manufacturing、IEC 61010-1 safety；每项认证均需针对具体配置在发货前确认，仅提供已实际签发的证书。应提供纯度不低于 99.5% 的氮气，可采用流量约 20 至 35 L/min 的发生器或液氮供应，并配备离子源废气排风管。应使用 LC-MS 级溶剂和添加剂，因为杂质会升高背景并抑制离子化。应定期使用厂家提供的校准液校准质量轴，并在每批样品前运行系统适用性进样。灵敏度下降时清洁喷雾护罩、毛细管和离子传输光学系统，并按计划更换旋片泵油。方法开发期间应通过柱后输注监测离子抑制。受监管实验室需要具备审计追踪和符合 21 CFR Part 11 电子签名的软件，并按 IQ、OQ 和 PQ 方案进行仪器确认。## 如何选择合适的质量导向纯化液质联用系统？当需要从 UV 触发不明确的混合物中分离已知质量的化合物时，应选择质量导向纯化系统；仅用于鉴定和定量则使用分析型 LC-MS。询价时应说明制备流速和压力范围、分流配置、收集器容量、定量环规格和放大软件。### 与其他液相色谱质谱联用仪型号相比如何？决定性的选择是质量分析器。单四极杆 LC-MS 以较低成本确认分子量并进行简单定量。三重四极杆仪器为生物分析、残留和临床检测中的靶向定量提供最佳灵敏度。Q-TOF 系统提供精确质量和未知物 MS/MS，适合杂质谱分析、代谢物鉴定和筛查。离子阱提供多级碎裂，适合结构研究。质量导向纯化系统则增加了馏分收集功能。随后应检查离子源选项（如 ESI、APCI 和 APPI）、适应峰宽小于 3 秒的 UHPLC 峰所需的扫描速度、正负离子切换速度，以及离子源对复杂基质的耐受性。确认与现有 LC 泵的兼容性、受监管工作所需的软件，以及鞘气和干燥气的氮气消耗量。