AF4-MALS 纳米颗粒分离分析系统

什么是 AF4-MALS 纳米颗粒分离分析系统？将不对称流场流分离与多角度光散射、紫外和示差折光检测相结合的系统。先按流体力学尺寸分离颗粒或大分子，再测定各组分的粒径、摩尔质量和浓度，可分辨混合物、聚集体和多分散样品。## 概述

在不对称流场流分离（AF4）中，样品被注入一个窄通道，积累壁上有半透膜。横向流把颗粒推向壁面，扩散又把它们推回；扩散系数较大的小颗粒在抛物线形通道流中位置更高，先被洗脱。洗脱液依次通过在线多角度光散射检测器、紫外检测器和示差折光检测器。MALS 提供均方根半径和摩尔质量，还可加装动态光散射测流体力学半径。与色谱柱不同，AF4 没有固定相，剪切和吸附降到最低，有利于脆弱的聚集体、囊泡和脂质纳米粒。典型范围为 1 nm 至 1 µm。横向流梯度、膜截留分子量和载液组成的方法开发需要时间。## 工作原理是什么？纳米颗粒追踪分析用激光片光照射稀悬浮液，由相机记录单个颗粒的散射光；软件跟踪每条轨迹并得出扩散系数，经 Stokes–Einstein 方程换算为流体力学直径，同时按已知体积计算每毫升颗粒数。电阻脉冲传感让颗粒通过电解质中的纳米孔，每个颗粒使离子电流瞬时下降，下降幅度与颗粒体积成正比，从而得到粒径和浓度。场流分离在窄通道中借助横向流下的扩散将颗粒分离，再由在线光散射检测器测定粒径和摩尔质量。纳米流式细胞仪通过流体动力学聚焦和高灵敏度侧向散射及荧光检测对单颗粒进行表型分析。样品稀释和参考微球校准必不可少。## 主要特点有哪些？- 不对称流通道，可更换多种截留分子量的膜 - 多角度光散射测定各组分的粒径和摩尔质量 - 在线紫外和示差折光检测器 - 可编程横向流梯度，适应宽粒径范围 - 可选动态光散射检测器 - 无固定相的温和分离，限制吸附

技术参数有哪些？典型的 AF4-MALS 纳米颗粒分离分析系统配置：粒径范围为 1 nm–1 µm；分离原理为 Asymmetric flow field-flow fractionation；MALS 检测器为 18 angles, 659 nm laser；横向流范围为 0–5 mL/min programmable；通道流速为 0.1–5 mL/min；膜截留分子量为 1–30 kDa regenerated cellulose or PES。以上数值代表该产品类别的常见水平，具体配置参数以报价单及随机校准文件为准。## 适用于哪些应用？AF4-MALS 纳米颗粒分离分析系统主要用于脂质纳米粒和脂质体分离、病毒样颗粒和 AAV 聚集体分析、聚合物和纳米颗粒摩尔质量分布、蛋白质聚集体分辨、环境和食品纳米材料。在更广泛的纳米颗粒分析仪类别中，实验室还将其用于脂质体和脂质纳米粒表征、细胞外囊泡和外泌体研究、病毒载体和疫苗颗粒计数。## 适用哪些标准与认证？相关标准与方法包括 ISO 19430、ISO 13322-1、ISO 22412、ISO/TS 21362、ASTM E2834、ISO 21363、GB/T 19627。本型号的认证候选包括 CE、ISO 9001 manufacturing；每项认证均需针对具体配置在发货前确认，仅提供已实际签发的证书。纳米颗粒测量对样品制备非常敏感。应使用无颗粒、经过滤的稀释剂和洁净的玻璃器皿，并稀释到仪器最佳浓度窗口。灰尘和气泡会产生假计数。开机时以及更改设置后，应使用有证的聚苯乙烯或二氧化硅纳米球标准物验证粒径和浓度，并报告相机电平、检测阈值、温度和追踪数，因为这些参数会改变结果。激光光学件、流通池和纳米孔需保持清洁并按要求储存。仪器应安装在稳定、温度受控的房间内。受监管工作需要 IQ/OQ/PQ、锁定的方法和审计追踪。## 如何选择合适的 AF4-MALS 纳米颗粒分离分析系统？当需要分辨混合物或聚集体并按摩尔质量和粒径表征，且色谱柱会造成剪切或吸附时，应选择 AF4-MALS。询价时请说明粒径范围、样品类型、载液组成、检测器（UV、dRI、DLS）、进样体积和验证要求。简单的单峰样品不需要增加方法开发的工作量。### 与其他纳米颗粒分析仪型号相比如何？首先明确测量要提供什么：多分散样品的浓度和粒径分布、荧光亚群计数、混合物的高分辨率分离，还是单颗粒表型。纳米颗粒追踪适合 30 至 1000 nm、浓度 10⁷ 至 10⁹ 颗粒/mL 的样品。电阻脉冲传感对导电分散体可给出高分辨率且与折射率无关的粒径。场流分离联用多角度光散射可分辨混合物和聚集体。需要标记和标志物分析时优先选择纳米流式细胞术。应核对检测下限是否低于最小颗粒、所需动态范围、样品体积以及对光学性质的依赖性。还需考虑是否适用 ISO 19430 等指导文件以及脂质体或疫苗的监管要求，并明确由谁操作和维护系统。