单颗粒纳米流式细胞仪

什么是单颗粒纳米流式细胞仪？专为纳米颗粒检测设计的流式细胞仪，具有流体动力学聚焦、高灵敏度侧向散射和多通道荧光。可测量约 40 nm 以上单个颗粒的粒径、浓度和标志物表达，适用于细胞外囊泡、病毒和脂质纳米粒。## 概述

纳米流式细胞仪以低流速泵送鞘流聚焦的样品流过流通池，一个或两个激光在数微秒内激发每个颗粒。灵敏的雪崩光电二极管或光电倍增管在两到四个通道中记录侧向散射和荧光。粒径通过二氧化硅或聚苯乙烯标准物和 Mie 建模校准，浓度则由已知流速下单位体积的事件数得到。多参数数据可用于表型分析，如外泌体的 CD9、CD63 或 CD81 阳性，以及同一颗粒上多个标志物的共定位。散射检测阈值通常为 40 至 80 nm，荧光为每颗粒数十个荧光分子。必须通过稀释和缓冲液空白控制群集检测、重合事件和背景噪声。## 工作原理是什么？纳米颗粒追踪分析用激光片光照射稀悬浮液，由相机记录单个颗粒的散射光；软件跟踪每条轨迹并得出扩散系数，经 Stokes–Einstein 方程换算为流体力学直径，同时按已知体积计算每毫升颗粒数。电阻脉冲传感让颗粒通过电解质中的纳米孔，每个颗粒使离子电流瞬时下降，下降幅度与颗粒体积成正比，从而得到粒径和浓度。场流分离在窄通道中借助横向流下的扩散将颗粒分离，再由在线光散射检测器测定粒径和摩尔质量。纳米流式细胞仪通过流体动力学聚焦和高灵敏度侧向散射及荧光检测对单颗粒进行表型分析。样品稀释和参考微球校准必不可少。## 主要特点有哪些？- 低流速流体动力学聚焦，延长颗粒通过时间 - 高灵敏度侧向散射和多通道荧光 - 使用二氧化硅和聚苯乙烯参考微球校准粒径 - 多参数表型分析，支持标志物共定位 - 在校准流速下按事件率给出绝对浓度 - 自动进样和清洗循环，重复性好

技术参数有哪些？典型的单颗粒纳米流式细胞仪配置：可检测粒径为 ≈ 40–1000 nm (scatter)；激光器为 488 nm and 561 or 640 nm；荧光通道为 2–4；样品流速为 0.3–5 µL/min；事件率为 ≤ 10,000 events/s；鞘液为 Filtered PBS, 0.1 µm。以上数值代表该产品类别的常见水平，具体配置参数以报价单及随机校准文件为准。## 适用于哪些应用？单颗粒纳米流式细胞仪主要用于外泌体和细胞外囊泡表型分析、病毒颗粒计数和标记、脂质纳米粒载荷分析、单颗粒上标志物共表达、血浆生物标志物发现。在更广泛的纳米颗粒分析仪类别中，实验室还将其用于脂质体和脂质纳米粒表征、细胞外囊泡和外泌体研究、病毒载体和疫苗颗粒计数。## 适用哪些标准与认证？相关标准与方法包括 ISO 19430、ISO 13322-1、ISO 22412、ISO/TS 21362、ASTM E2834、ISO 21363、GB/T 19627。本型号的认证候选包括 CE、ISO 9001 manufacturing；每项认证均需针对具体配置在发货前确认，仅提供已实际签发的证书。纳米颗粒测量对样品制备非常敏感。应使用无颗粒、经过滤的稀释剂和洁净的玻璃器皿，并稀释到仪器最佳浓度窗口。灰尘和气泡会产生假计数。开机时以及更改设置后，应使用有证的聚苯乙烯或二氧化硅纳米球标准物验证粒径和浓度，并报告相机电平、检测阈值、温度和追踪数，因为这些参数会改变结果。激光光学件、流通池和纳米孔需保持清洁并按要求储存。仪器应安装在稳定、温度受控的房间内。受监管工作需要 IQ/OQ/PQ、锁定的方法和审计追踪。## 如何选择合适的单颗粒纳米流式细胞仪？当需要单颗粒标志物分析、多参数表型分析和共定位（如囊泡研究）时，应选择纳米流式细胞仪。询价时请说明激光器和通道、检测粒径阈值、事件率、样品体积和校准标准物。仅需无标记的粒径和浓度时，追踪分析或电阻脉冲传感更简单。### 与其他纳米颗粒分析仪型号相比如何？首先明确测量要提供什么：多分散样品的浓度和粒径分布、荧光亚群计数、混合物的高分辨率分离，还是单颗粒表型。纳米颗粒追踪适合 30 至 1000 nm、浓度 10⁷ 至 10⁹ 颗粒/mL 的样品。电阻脉冲传感对导电分散体可给出高分辨率且与折射率无关的粒径。场流分离联用多角度光散射可分辨混合物和聚集体。需要标记和标志物分析时优先选择纳米流式细胞术。应核对检测下限是否低于最小颗粒、所需动态范围、样品体积以及对光学性质的依赖性。还需考虑是否适用 ISO 19430 等指导文件以及脂质体或疫苗的监管要求，并明确由谁操作和维护系统。