高通量自动细胞计数仪

什么是高通量自动细胞计数仪？高通量自动细胞计数仪逐孔读取多孔板并报告浓度与活率，数分钟内完成一块 96 孔板的检测，用于生物工艺开发、克隆筛选和检测质量控制。## 概述

该仪器由板架机构、明场与荧光光学系统和逐孔分析软件组成。板制备时将少量细胞悬液与活率染料混合，计数仪对每个孔中固定区域成像，报告浓度、活率、平均细胞直径，配备荧光通道时还可按荧光标记区分细胞计数。整块 96 孔板通常在 5–15 分钟内完成，因此时间序列或克隆筛选实验可反复计数而无需人工操作。由于样品体积小，每孔 10–20 µL 即可。使用一次性板并在固定光学载台上测量可限制孔间污染，结果以板图形式导出以便后续分析。## 工作原理是什么？各种计数方法区分细胞与碎片、死细胞的方式不同。台盼蓝排斥法依赖活细胞完整膜排斥染料的能力，因此透射光下活细胞明亮、死细胞呈蓝色；自动化计数仪对计数腔中固定体积成像，并按大小、形状和亮度对对象分类。荧光法使用吖啶橙和碘化丙啶，分别对所有细胞核和膜受损细胞核染色，通过两个通道得出浓度和活率，受红细胞、血小板和碎片干扰较小。电阻抗计数仪使细胞通过小孔并计数电压脉冲，脉冲高度反映细胞体积。流式计数法加入已知数量的参考微球，通过细胞事件与微球事件的比例计算绝对计数，同时提供标志物信息。所有方法都要求样品充分混匀并适当稀释才能保证准确。## 主要特点有哪些？- 多孔板读取并逐孔输出结果 - 明场与可选荧光通道 - 5–15 分钟完成一块 96 孔板 - 报告浓度、活率与平均直径 - 导出板图，便于时间序列或克隆筛选 - 每孔仅需 10–20 µL 样品

技术参数有哪些？典型的高通量自动细胞计数仪配置：板规格为 96-well and 24-well；整板处理时间为 approx. 5–15 min；每孔样品体积为 10–20 µL；浓度范围为 approx. 1 x 10⁴–1 x 10⁷ cells/mL；细胞大小范围为 approx. 3–60 µm；成像模式为 Brightfield, optional fluorescence channels。以上数值代表该产品类别的常见水平，具体配置参数以报价单及随机校准文件为准。## 适用于哪些应用？高通量自动细胞计数仪主要用于克隆筛选与克隆稳定性研究、生物反应器时间序列细胞密度监测、细胞学检测板的质控、培养基与添加物优化实验。在更广泛的细胞计数仪类别中，实验室还将其用于实验前接种密度测定、培养生长与活率监测、细胞治疗产品放行计数。## 适用哪些标准与认证？相关标准与方法包括 ISO 20387、ISO 15189、IEC 61010-1、IEC 60825-1、USP <1046>、ISO 17025。本型号的认证候选包括 CE、ISO 9001 manufacturing、IEC 61010-1 safety；每项认证均需针对具体配置在发货前确认，仅提供已实际签发的证书。准确性更多取决于样品处理而非仪器本身。细胞沉降很快，因此在取样前应轻轻颠倒混匀或用低速移液混匀，避免剧烈涡旋损伤细胞膜。应将样品稀释到方法的线性范围内，因为过浓样品会使传感器饱和，而过稀样品会降低精密度。计数板或计数腔等耗材应一次性使用并按生物危害废弃物处置。应定期清洁光学系统和样品流路，并避免使用含强染料或荧光化合物、会干扰荧光通道的样品。每种新细胞类型或基质都应与血细胞计数板或经验证的流式计数等参考方法比对验证，并记录所用稀释倍数和参数，因为不同实验室对活率的定义可能不同。## 如何选择合适的高通量自动细胞计数仪？当需要对大量平行培养物进行反复测量，例如克隆筛选或培养基优化时，应选择板式高通量计数仪。询价时应注明板规格、处理时间、荧光通道选项、样品体积，以及是否归档逐孔图像以供审核。### 与其他细胞计数仪型号相比如何？应根据样品类型和所需准确度选择。常规培养已建立的细胞系，使用台盼蓝图像法计数仪即可满足需求且成本较低。当样品含碎片、红细胞、血小板或结团，或活率较低需要精确测定时，应选择采用吖啶橙和碘化丙啶的荧光计数仪，通过细胞核染色报告浓度和活率。阻抗计数仪适合连续监测细胞大小分布，也适合光学澄清度多变的样品。当计数需与表面标志物测定结合，或临床报告需要绝对计数时，应选择流式计数法。还应确认线性范围、样品体积、单次计数时间、耗材成本、清洁要求，以及仪器是否提供聚集体或结团校正。