自动化图像法细胞计数仪

什么是自动化图像法细胞计数仪？自动化图像法细胞计数仪将少量样品加载到一次性计数板，在透射光下对固定体积成像，依据台盼蓝排斥法报告浓度和活率，用于替代常规培养中的手工血细胞计数板计数。## 概述

该仪器由明场光学模块、电动载物台或固定对焦系统和图像分析算法组成。将 10–20 µL 与台盼蓝混合的样品吸入具有确定腔深的一次性计数板，软件按大小和对比度识别对象，剔除低于尺寸阈值的碎片，并将染成蓝色的细胞判为无活性。结果约 30 秒内显示，并附大小分布直方图。典型测量范围为 2–70 µm，浓度线性范围约为 10⁴ 至 10⁷ cells/mL，样品充分混匀时准确度在参考方法的 10% 以内。该形式操作简单、培训要求低，避免了手工计数的主观性，但在含大量死细胞碎片或红细胞的样品中可能高估活率。## 工作原理是什么？各种计数方法区分细胞与碎片、死细胞的方式不同。台盼蓝排斥法依赖活细胞完整膜排斥染料的能力，因此透射光下活细胞明亮、死细胞呈蓝色；自动化计数仪对计数腔中固定体积成像，并按大小、形状和亮度对对象分类。荧光法使用吖啶橙和碘化丙啶，分别对所有细胞核和膜受损细胞核染色，通过两个通道得出浓度和活率，受红细胞、血小板和碎片干扰较小。电阻抗计数仪使细胞通过小孔并计数电压脉冲，脉冲高度反映细胞体积。流式计数法加入已知数量的参考微球，通过细胞事件与微球事件的比例计算绝对计数，同时提供标志物信息。所有方法都要求样品充分混匀并适当稀释才能保证准确。## 主要特点有哪些？- 明场成像结合台盼蓝测定浓度与活率 - 每样品计数时间约 30 秒 - 提供大小分布直方图并可调整设门范围 - 一次性计数板具有确定腔深 - 浓度线性范围约 10⁴ 至 10⁷ cells/mL - 结果可导出至表格或实验室记录系统

技术参数有哪些？典型的自动化图像法细胞计数仪配置：样品体积为 10–20 µL per count；计数时间为 approx. 30 s；细胞大小范围为 approx. 2–70 µm；浓度范围为 approx. 1 x 10⁴–1 x 10⁷ cells/mL；准确度为 within ±10% of reference method (typical)；成像方式为 Brightfield with fixed or autofocus optics。以上数值代表该产品类别的常见水平，具体配置参数以报价单及随机校准文件为准。## 适用于哪些应用？自动化图像法细胞计数仪主要用于常规细胞系培养监测、接种密度计算、转染与感染实验的归一化、教学实验室细胞培养。在更广泛的细胞计数仪类别中，实验室还将其用于实验前接种密度测定、培养生长与活率监测、细胞治疗产品放行计数。## 适用哪些标准与认证？相关标准与方法包括 ISO 20387、ISO 15189、IEC 61010-1、IEC 60825-1、USP <1046>、ISO 17025。本型号的认证候选包括 CE、ISO 9001 manufacturing、IEC 61010-1 safety；每项认证均需针对具体配置在发货前确认，仅提供已实际签发的证书。准确性更多取决于样品处理而非仪器本身。细胞沉降很快，因此在取样前应轻轻颠倒混匀或用低速移液混匀，避免剧烈涡旋损伤细胞膜。应将样品稀释到方法的线性范围内，因为过浓样品会使传感器饱和，而过稀样品会降低精密度。计数板或计数腔等耗材应一次性使用并按生物危害废弃物处置。应定期清洁光学系统和样品流路，并避免使用含强染料或荧光化合物、会干扰荧光通道的样品。每种新细胞类型或基质都应与血细胞计数板或经验证的流式计数等参考方法比对验证，并记录所用稀释倍数和参数，因为不同实验室对活率的定义可能不同。## 如何选择合适的自动化图像法细胞计数仪？当常规培养已建立的细胞系且台盼蓝计数即可满足要求时，应选择图像法计数仪。询价时应注明大小范围、浓度线性、计数时间、计数板耗材成本，以及配置的是自动对焦还是固定光学系统。### 与其他细胞计数仪型号相比如何？应根据样品类型和所需准确度选择。常规培养已建立的细胞系，使用台盼蓝图像法计数仪即可满足需求且成本较低。当样品含碎片、红细胞、血小板或结团，或活率较低需要精确测定时，应选择采用吖啶橙和碘化丙啶的荧光计数仪，通过细胞核染色报告浓度和活率。阻抗计数仪适合连续监测细胞大小分布，也适合光学澄清度多变的样品。当计数需与表面标志物测定结合，或临床报告需要绝对计数时，应选择流式计数法。还应确认线性范围、样品体积、单次计数时间、耗材成本、清洁要求，以及仪器是否提供聚集体或结团校正。