水平电泳

水平电泳的工作原理是什么？在水平系统中，琼脂糖凝胶在制胶盘中灌制，放入电泳槽，并浸没在流动缓冲液（通常为 TAE 或 TBE）下方数毫米处。在铂金或不锈钢电极之间施加电压后，带负电的核酸穿过琼脂糖孔隙向阳极迁移。较短的片段迁移更快，因此条带按长度排列，借助分子量标准可估算片段大小。缓冲液既导电又带走焦耳热，因此每厘米电极间距的电压受到限制，通常为 5–10 V/cm。条带可用溴化乙锭或更安全的替代嵌入染料，在紫外光或蓝光下显示。关键部件包括电泳槽、制胶盘、形成加样孔的梳子、电极引线和安全盖。## 水平电泳有哪些型号？- 微型水平凝胶电泳系统：一种紧凑型水平电泳槽，凝胶尺寸约 7 x 10 cm，缓冲液用量少，运行时间为 20–40 分钟。- 中型水平凝胶电泳系统：一种中型水平电泳槽，凝胶尺寸约 15 x 15 cm，可容纳 20–40 个样品，分辨率优于微型规格。- 宽幅水平凝胶电泳系统：一种带宽凝胶床的大型水平电泳槽，凝胶尺寸通常为 20 x 25 cm，适合多通道移液器上样，每块凝胶可容纳 96 个或更多样品。- 双层托盘多胶水平电泳系统：一种水平电泳槽，在同一缓冲液腔中并排或叠放运行两个或更多凝胶托盘，无需第二个电泳槽或电源即可使通量翻倍。- 脉冲场凝胶电泳系统：一种水平系统，周期性切换电场方向，以分离约 10 kb 至数兆碱基的超大 DNA 分子。## 如何选择合适的型号？首先选择凝胶尺寸，因为它决定运行时间、样品数量和分辨率。微型槽适合快速检查少量样品，中型和标准尺寸兼顾通量与分辨率，宽幅槽可配合多通道移液器用于 96 孔流程。应核对最大电压和缓冲液体积，因为较大的电泳槽需要更大的电源和更多缓冲液。考虑双层托盘或可拆卸制胶系统能否提高效率。只有对约 50 kb 以上的片段（如基因组 DNA 分型）才需要脉冲场系统。还应确认梳子厚度和齿数选项、电极材料、盖联锁设计、聚碳酸酯或亚克力槽体的耐化学性，以及替换托盘和梳子是否易于获得。## 水平电泳用于哪些领域？水平电泳广泛用于 PCR 产物验证、酶切产物分析、RNA 完整性检查、质粒和 DNA 纯化质量控制、脉冲场凝胶基因组 DNA 分型。## 适用哪些标准与认证？水平电泳相关工作通常依据 IEC 61010-1、IEC 61326-1、ISO 17025、Ph. Eur. 2.2.31。CE 等仪器认证需按具体配置逐项确认，不作默认承诺。## 采购前需要考虑哪些要点？电泳槽应放在水平、无振动的工作台上，远离水槽，电源应置于溅水区以外。应定期更换电泳缓冲液，因为离子耗竭和 pH 漂移会在多次使用后降低分辨率。用温和洗涤剂清洁电泳槽并以去离子水冲洗，避免使用会使亚克力龟裂的溶剂。检查电极是否腐蚀，以及盖联锁和引线绝缘是否完好。处理溴化乙锭和紫外光源时应遵守当地化学和光学安全规定，或改用更安全的染料。电气安全应遵循 IEC 61010-1。记录电压、时间、凝胶浓度和缓冲液批号以便追溯，并选用与片段范围相符的标准分子量。