蛋白质微型垂直凝胶电泳系统

什么是蛋白质微型垂直凝胶电泳系统？一种紧凑型垂直装置，适用于 8 x 7 cm 聚丙烯酰胺凝胶，可在 40–90 分钟内运行一至四块凝胶。是常规 SDS-PAGE、纯度检查和 western blot 前样品制备的标准选择。## 概述

微型垂直系统是蛋白质实验室中使用最广泛的规格。中央芯体可固定一到两个凝胶盒，上缓冲液腔由芯体与玻璃板构成，因此外槽只需约 100–200 mL 缓冲液。约 10 x 10 cm 的玻璃板与 10 x 8 cm 的短板可制成约 8 x 7 cm 的凝胶，有 10、12、15 或 17 个加样孔，厚度为 0.75 至 1.5 mm。灌胶架可一次灌制多块凝胶，多数设计也可使用商品化预制胶盒。在 100–200 V 下运行需 40–90 分钟。其分辨率足以分离约 5 至 250 kDa 的蛋白质，复杂样品则可能需要更长的凝胶。## 工作原理是什么？在垂直系统中，聚丙烯酰胺凝胶灌制在由间隔条隔开的两块玻璃板之间，安装后其上端浸入上缓冲液腔，下端浸入下缓冲液腔。两个腔室之间的电压驱动带电分子向下穿过凝胶。聚丙烯酰胺形成的网孔比琼脂糖更紧密均匀，孔径由丙烯酰胺总浓度和交联剂比例决定，因此相差数千道尔顿的蛋白质或仅差一个核苷酸的片段也可分辨。在不连续 SDS-PAGE 中，浓缩胶先将样品压缩成锐利的条带，再进入分离胶。关键部件包括玻璃板、间隔条、梳子、夹具、密封垫、缓冲液腔，以及带走焦耳热的冷却芯或冷却板。## 主要特点有哪些？- 中央芯体固定一到两块凝胶并构成上缓冲液腔，缓冲液用量少 - 可使用 0.75、1.0 和 1.5 mm 厚度、10 至 17 孔的凝胶 - 灌胶架一次可灌制多达十块凝胶，凝胶高度一致 - 兼容常见的商品化同尺寸预制微型凝胶盒 - 带联锁盖和颜色编码引线，防止接反和意外接触 - 硼硅玻璃板和硅胶密封垫在反复使用中保持良好密封

技术参数有哪些？典型的蛋白质微型垂直凝胶电泳系统配置：凝胶尺寸（宽 x 长）为 approx. 8 x 7 cm；凝胶厚度选项为 0.75, 1.0, 1.5 mm；每次运行凝胶数为 1–4；每把梳子加样孔数为 10, 12, 15, 17；缓冲液体积为 approx. 600–1000 mL total；最大电压为 300 V DC。以上数值代表该产品类别的常见水平，具体配置参数以报价单及随机校准文件为准。## 适用于哪些应用？蛋白质微型垂直凝胶电泳系统主要用于常规 SDS-PAGE、蛋白纯度检查、Western blot 样品制备、教学实验室。在更广泛的垂直电泳类别中，实验室还将其用于 SDS-PAGE 蛋白质分离、天然 PAGE 和活性染色胶、双向电泳。## 适用哪些标准与认证？相关标准与方法包括 IEC 61010-1、IEC 61326-1、Ph. Eur. 2.2.31、USP <1053>、ISO 17025。本型号的认证候选包括 CE、ISO 9001 manufacturing、RoHS；每项认证均需针对具体配置在发货前确认，仅提供已实际签发的证书。每次灌胶前应在干净平整的表面上组装玻璃板，并检查密封垫和间隔条是否损坏，因为漏液会毁掉凝胶并污染下缓冲液腔。丙烯酰胺单体具有神经毒性，应佩戴手套，并尽可能使用已聚合的凝胶或预制胶。使用新鲜的过硫酸铵和 TEMED 以获得可重复的聚合。缓冲液腔应加至标记液位，长时间运行时应装上冷却芯。用无磨损性的洗涤剂清洁玻璃板，切勿用刀片分离。电气安全遵循 IEC 61010-1，配联锁盖和绝缘引线。记录凝胶浓度、缓冲液批号和运行条件，并用分子量标准验证性能。## 如何选择合适的蛋白质微型垂直凝胶电泳系统？对于样品复杂度适中、需要频繁快速检查蛋白的情况，应选择微型规格。较大规格对复杂样品的分辨效果更好。询价时应注明凝胶尺寸和厚度、每次运行的凝胶数、与预制胶盒的兼容性、灌胶架容量、最大电压，以及是否包含冷却芯。### 与其他垂直电泳型号相比如何？应根据应用确定凝胶规格。约 8 x 7 cm 的微型凝胶快速经济，适用于常规蛋白检查和 western blot 前处理。中型和大型凝胶为复杂样品提供更长的分离路径，20 x 20 cm 的玻璃板是双向电泳的标准尺寸。带长而薄玻璃板的测序装置适用于单碱基分辨率的核酸工作。应考虑通量、是否需要同时灌制和运行多块凝胶，以及长时间高压运行是否需要冷却。检查 0.75 至 1.5 mm 的凝胶厚度选项、梳子孔数、与预制胶的兼容性，以及玻璃板和间隔条的质量，因为玻璃破损会造成漏液。电源应满足电压和电流需求，多胶运行时尤其如此。