ELISA 系统

ELISA 系统的工作原理是什么？酶联免疫吸附试验使用塑料微孔板，孔内包被捕获抗体或抗原。加入样本后，目标物在温育过程中与固相结合。洗涤后加入与辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶等酶偶联的检测抗体，与已捕获的目标物结合。再次洗涤去除未结合的结合物，随后加入底物，酶将其转化为有色产物。用酸或碱终止反应，并在规定波长读取吸光度，通常为 450 纳米，并设 600 至 650 纳米的参比波长。吸光度与结合分析物的量成正比，校准曲线（常为四参数逻辑模型）把读数换算为浓度或指数值。严格的洗涤、温育计时和温度控制决定结果的可靠性。## ELISA 系统有哪些型号？- 酶标仪：酶标仪是在 96 孔板或条式板上按选定波长测量吸光度并将其换算为浓度或指数值的光度计，是开展微孔板形式酶免疫检测实验室的核心仪器。- 自动洗板机：自动洗板机按程序向微孔板孔中加注并吸出洗涤液，在各步骤之间去除未结合物质。- 酶标仪洗板机一体机：该系统将酶标仪和洗板机整合为同一仪器并共用软件，使洗板与读数在同一队列和同一方案下完成，适合希望在无两台设备占地与定位问题的前提下获得一致 ELISA 处理的实验室。- 全自动酶免分析系统：全自动酶免分析系统可自动完成样本和试剂加样、温育、洗板、加底物和读数，适合每日处理数百至数千孔、涉及多种试剂盒方案的医院和参比实验室。- 带温育与振荡的酶免工作站：该工作站将带振荡功能的微孔板温育器与读数仪整合为一体，使对温度敏感的步骤和读数都在受控条件下完成，适合开展动力学或温度敏感项目并希望减少步骤间手工操作的实验室。## 如何选择合适的型号？首先确定检测项目，再决定合适的自动化程度。每日少于一百个孔的实验室可用酶标仪加洗板机并手工加样，工作量更大时则适合配备机械臂、温育和报告功能的全自动处理系统。比较酶标仪时关注波长范围、滤光片配置、线性，以及是否支持动力学法和双波长测量。洗板机应检查残留体积、可编程洗涤次数，以及适配 96 孔板和条式板的歧管。全自动系统应关注板容量、无人值守时间、软件是否集中管理检测方案，以及每一步骤能否通过批号和操作者身份追溯。确认检测试剂在目标市场的注册状态，因为 ELISA 试剂盒与仪器分别监管。## ELISA 系统用于哪些领域？ELISA 系统广泛用于传染病血清学检测、过敏特异性 IgE 检测、自身免疫抗体筛查、科研与临床试验检测。## 适用哪些标准与认证？ELISA 系统相关工作通常依据 ISO 15189、CLSI EP05、CLSI I/LA20、CLSI M29、IEC 61010-1、IEC 61010-2-101。CE 等仪器认证需按具体配置逐项确认，不作默认承诺。## 采购前需要考虑哪些要点？应将酶标仪和洗板机放在水平台面上，远离振动和直射光，并保持板架与光学窗口无尘。安装时用参考染色板验证光学准确性，并针对各项目使用质控品验证性能。日常工作包括检查洗板机歧管是否堵塞、预充洗涤管路，并运行两至三个水平的质控品。终止反应后应立即读板，因为颜色会继续显色，延迟会造成偏差，且全板计时一致比绝对速度更重要。液流不均时更换管路和歧管针，洗涤废液和用过的板按生物危害物处理。