反射式 MALDI-TOF 质谱仪

什么是反射式 MALDI-TOF 质谱仪？反射式 MALDI-TOF 在飞行路径中增加离子镜，对肽、寡核苷酸和聚合物可达到 15000 至 25000 的分辨率和数 ppm 的质量准确度。用于肽质量指纹图谱、合成聚合物端基分析以及生物分子质量控制。## 概述

反射式 MALDI-TOF 用脉冲激光使分析物从结晶基质中解吸并电离，并用反射器使离子重新聚焦。数百纳秒的延迟引出可校正初速度分散，综合效应使 m/z 2500 处分辨率提升至 15000 至 25000 FWHM，可分辨肽和小蛋白的同位素峰。外标校准下质量准确度为 5 至 20 ppm，内标校准下低于 5 ppm。仪器对 m/z 30000 以上的大分子采用线性模式，对较低质量采用反射模式，并可自动切换。1 至 2 kHz 的激光重复频率可实现快速采集和 50 至 100 µm 空间分辨率成像。碎裂仅限于源后衰变，因此肽测序能力弱于 TOF/TOF 仪器。该配置非常适合肽质量指纹图谱、聚合物分子量分布和寡核苷酸质量检查。## 工作原理是什么？在飞行时间质谱仪中，离子在数百伏至 20 kV 的加速电势下获得相同动能，然后在无场管中漂移。飞行时间与 m/z 的平方根成正比，因此检测器（微通道板或快速电子倍增器）按质量顺序记录离子。分辨率取决于飞行路径长度和对初始能量分散的校正。反射器（离子镜）可延长路径并使质量相同但能量不同的离子重新聚焦，将分辨率从约 1000 提高到 20000 或更高。MALDI 离子源天然产生脉冲离子，而正交加速则将连续的 ESI 或 ICP 离子束转化为脉冲。吉赫兹级的时间数字转换器或快速数字化仪记录信号。## 主要特点有哪些？- 带延迟引出的反射器，m/z 2500 处分辨率达 15000 至 25000 FWHM - 线性与反射模式自动切换，覆盖宽质量范围 - 1 至 2 kHz 激光，配随机游走样品栅格扫描，谱图重现性好 - 支持以肽混合物或聚合物标准进行内标校准 - 可选成像功能，对组织切片进行 50 µm 分辨率质谱成像 - 聚合物分析软件，可计算 Mn、Mw 和多分散指数

技术参数有哪些？典型的反射式 MALDI-TOF 质谱仪配置：质量范围（反射模式）为 m/z 500–30000；质量范围（线性模式）为 up to m/z 500000；分辨率（反射模式，m/z 2500）为 ≥ 15000 FWHM；质量准确度（内标校准）为 ≤ 5 ppm；质量准确度（外标校准）为 ≤ 20 ppm；激光重复频率为 up to 2 kHz。以上数值代表该产品类别的常见水平，具体配置参数以报价单及随机校准文件为准。## 适用于哪些应用？反射式 MALDI-TOF 质谱仪主要用于蛋白质鉴定的肽质量指纹图谱、合成聚合物分子量分布、寡核苷酸质量控制、组织成像质谱、小蛋白和抗体片段的完整质量。在更广泛的飞行时间质谱仪类别中，实验室还将其用于临床微生物学中的微生物鉴定、完整蛋白和肽的质量分析、合成聚合物分子量分布。## 适用哪些标准与认证？相关标准与方法包括 ASTM D7134、ISO 11260、ISO/TS 16940、USP <1052> Biotechnology-Derived Articles、ASTM E2933、ISO 15189、ISO/IEC 17025、IEC 61010-1。本型号的认证候选包括 CE、ISO 9001 manufacturing、IEC 61010-1 safety；每项认证均需针对具体配置在发货前确认，仅提供已实际签发的证书。TOF 仪器对温度变化敏感，因为漂移管热膨胀会改变飞行时间，因此应安装在温度稳定在 ±1 至 2 °C 内且远离气流的房间。应经常用标准品或内部锁定质量校准，以保持低于 5 ppm 的质量准确度。MALDI 系统需要制备基质（如 α-氰基-4-羟基肉桂酸或芥子酸），并仔细清洁靶板。检测器微通道板会随时间退化，应监测增益并计划更换，通常在数年后。保持真空系统气密，分析器压力低于 10^-6 mbar。受监管实验室，尤其是将 MALDI 用于临床微生物学的实验室，应确认经验证的数据库和支持审计追踪与权限控制的软件。## 如何选择合适的反射式 MALDI-TOF 质谱仪？当需要肽、聚合物或寡核苷酸的精确质量但不需要 MS/MS 测序时，应选择反射式 MALDI-TOF；测序则选 MALDI-TOF/TOF。询价时应说明指定 m/z 下的分辨率、质量准确度模式、激光频率、成像选项和聚合物软件。### 与其他飞行时间质谱仪型号相比如何？应根据电离源和所需分辨率选择。MALDI-TOF 适用于完整蛋白、聚合物和微生物鉴定，线性模式可达 m/z 100000 以上，反射模式则提高肽的准确度。正交加速 ESI-TOF 为 LC-MS 提供精确质量，其速率与 UHPLC 兼容。多反射设计以紧凑的体积达到 50000 至 100000 的分辨率，适合要求苛刻的筛查。应考虑质量准确度（校准后通常为 1 至 5 ppm）、目标 m/z 范围内的分辨率、采集速率，以及比四极杆窄的动态范围。还需确定是否需要串联质谱，因为 TOF/TOF 增加了用于测序的碎裂功能。检查微生物数据库或聚合物分析软件、校准策略和服务支持。