转子式实时荧光定量 PCR 仪

什么是转子式实时荧光定量 PCR 仪？转子式实时荧光定量 PCR 仪将 36 至 100 支反应管置于环形转子中旋转，由空气加热和冷却，每支管经过光学头时被读取。适合需要快速升降温并使每支管光路相同的中小批量检测。## 概述

转子式热循环仪的反应管置于转盘中，在由电阻元件加热、环境气流冷却的腔室内以约 400 rpm 旋转。由于空气均匀包围每支管，且每支管经过同一个光学检测器，孔间差异很小，温度均一性约 ±0.25 °C，光路长度完全一致。空气加热使腔室升降温速率达 10–15 °C/s，40 个循环可在 30–45 分钟内完成。常见转子容量为 36、72 或 100 管，使用 0.1 或 0.2 mL 排管。反应体积 10–25 µL。该设计不使用板式规格，适合几十份样本的批次，而非高通量板式筛选。## 工作原理是什么？实时荧光定量 PCR 系统将 Peltier 或热风加热模块与激发光源、滤光片和检测器结合。反应体系含有荧光报告分子，可以是与双链 DNA 结合的嵌入染料（如 SYBR Green），也可以是序列特异性探针，如水解探针（TaqMan 型）或分子信标。LED 或卤素灯发出的激发光经滤光片组，由光电二极管、PMT 或 CCD 在每个退火或延伸步骤结束时读取发射光。软件绘制荧光—循环数曲线，并在信号越过阈值处给出定量循环值 Cq（或 Ct）。Cq 与起始拷贝数对数成反比，可用于标准曲线法或相对定量。熔解曲线分析可进一步核查产物特异性。## 主要特点有哪些？- 空气加热腔室，升降温速率 10–15 °C/s - 单个光学头沿同一光路读取每支管 - 转子容量 36、72 或 100 管 - 排管中 10–25 µL 低体积反应 - 40 个循环快速运行，30–45 分钟 - 提供四至六通道选项，支持多重检测

技术参数有哪些？典型的转子式实时荧光定量 PCR 仪配置：管规格为 36, 72 or 100 tubes (0.1/0.2 mL strips)；光学通道为 4 to 6；温度范围为 35–99 °C；最大升降温速率（腔室）为 10–15 °C/s；温度均一性为 ±0.25 °C；反应体积为 10–25 µL。以上数值代表该产品类别的常见水平，具体配置参数以报价单及随机校准文件为准。## 适用于哪些应用？转子式实时荧光定量 PCR 仪主要用于病原体快速检测、小批量基因表达研究、高分辨熔解基因分型、食品与环境检测。在更广泛的实时荧光定量 PCR 仪类别中，实验室还将其用于临床病原体核酸检测、RT-qPCR 基因表达分析、食品与转基因检测。## 适用哪些标准与认证？相关标准与方法包括 ISO 20395、ISO 22174、CLSI MM06、CLSI MM19、IEC 61010-1、IEC 61010-2-101、MIQE guidelines (research reporting)。本型号的认证候选包括 CE、ISO 9001 manufacturing；每项认证均需针对具体配置在发货前确认，仅提供已实际签发的证书。应将仪器安装在水平、无振动的台面上，避开阳光，环境温度 15–30 °C，市电稳定。安装时以及更换灯泡或 LED 后，应使用供应商提供的染料或 ROX 校准板进行光学校准，并每年验证一次热均一性。使用与孔位规格匹配的光学透明、低荧光背景的板和封膜，避免在封膜上留下指纹。PCR 前后区域应分开，切勿在仪器附近打开已扩增的板。临床实验室应按质量体系规划软件验证、权限控制和审计追踪，并备份运行文件与熔解曲线数据。## 如何选择合适的转子式实时荧光定量 PCR 仪？对于重视速度与光学一致性的小批量检测，如每日的临床或食品样本，可选择转子式热循环仪。它不使用板，因此与模块式系统相比自动化受限。询价时应说明转子容量、管型、通道数、参考方案的运行时间、高分辨熔解能力，以及供应商能否提供管与锁环等配件。### 与其他实时荧光定量 PCR 仪型号相比如何？首先确定通量和规格：96 孔适合大多数实验室，384 孔适合大批量筛选，转子式或便携式机型适合小批量。其次按多重检测需求匹配光学通道数，四通道可覆盖多数含内参的双重或三重检测，五至六通道可支持更大的检测组合。核对激发与发射滤光片是否适配所用染料，包括 FAM、HEX/VIC、ROX 和 Cy5。比较热均一性与升降温速率、低拷贝检测灵敏度，以及软件功能，如绝对定量、熔解曲线和基因表达分析。对于受监管的诊断应用，应确认审计追踪、用户权限和数据导出选项，并询问是否提供 IVD 注册支持。