高通量实时荧光定量 PCR 系统（384 孔）

什么是高通量实时荧光定量 PCR 系统（384 孔）？384 孔实时荧光定量 PCR 系统每块板可运行多达 384 个 5 至 20 μL 的反应，具备快速升降温和机械臂上样选项。它适用于每天处理数百个样品并希望降低单反应试剂用量的筛选、生物样本库和公共平台实验室。## 概述

384 孔系统使用孔更小（通常为 5 至 20 μL）的热模块，以及灵敏度足够且整板照明均匀的光学系统。快速帕尔贴模块可达 5 至 6 °C/s，因此 40 个循环的运行大约需要 35 至 60 分钟。所有孔的读数均一性是关键规格，因为边缘孔容易出现偏差。自动化选项包括板堆栈器以及与移液工作站的集成，可实现多块板的无人值守运行。通常配备四到六个光学通道。5 至 10 μL 的反应体积可降低试剂成本，但蒸发和移液精密度要求更高，需要良好的封板和经校准的移液。软件支持板布局模板、批量分析、自动阈值设定和 LIMS 导出。## 工作原理是什么？分子分析仪器对核酸靶标进行扩增并通过荧光监测反应。在实时荧光定量 PCR 中，热模块在变性、退火和延伸之间循环，光学系统在每个循环读取 SYBR Green 等嵌入染料或 TaqMan 等水解探针的信号。荧光越过阈值时的循环数，即定量循环数（Cq），与起始拷贝数呈反比，通过标准曲线或比较法可得到相对或绝对量。数字 PCR 将反应分割为数千个纳升级微滴或微孔，分别扩增并统计阳性分区，然后利用泊松统计得到绝对拷贝数，无需标准曲线。LAMP 等等温方法在恒温下扩增，并检测荧光或浊度。熔解曲线分析用于验证产物特异性。## 主要特点有哪些？- 每板 384 孔，5 至 20 μL 反应体积，降低试剂成本。- 快速模块，升降温速率 5 至 6 °C/s。- 包括边缘孔在内所有孔的光学读数均一。- 板堆栈器和移液工作站集成，实现无人值守运行。- 四到六个荧光通道，支持多重检测。- 批量分析，带板模板和可对接 LIMS 的导出功能。## 技术参数有哪些？典型的高通量实时荧光定量 PCR 系统（384 孔）配置：样品容量为 384 wells (also 96-well with adapter)；反应体积为 5–20 μL；温度范围为 4–100 °C；最大升降温速率为 5–6 °C/s；温度均一性为 ±0.3 °C；荧光通道为 4–6。以上数值代表该产品类别的常见水平，具体配置参数以报价单及随机校准文件为准。## 适用于哪些应用？高通量实时荧光定量 PCR 系统（384 孔）主要用于高通量基因表达筛选、生物样本库样品基因分型、临床研究检测方法开发、环境和食品病原体筛查。在更广泛的分子分析仪器类别中，实验室还将其用于基因表达分析、病原体检测方法开发、病毒载体和残留 DNA 定量。## 适用哪些标准与认证？相关标准与方法包括 IEC 61010-1、IEC 61010-2-010、IEC 61010-2-101、IEC 61326-2-6、ISO 20395、ISO 22174、MIQE guidelines。本型号的认证候选包括 CE、ISO 9001 manufacturing、IEC 61010-2-010 test report；每项认证均需针对具体配置在发货前确认，仅提供已实际签发的证书。分子分析仪器需要严格的污染控制：分开扩增前和扩增后区域，使用带滤芯吸头，并设置无模板对照。应定期用经校准的温度探头核查热模块的温度准确性和均一性，并在安装后及按制造商建议的间隔，使用染料板进行光学校准。仪器应放在稳定的台面上并保持良好通风，并避免灯或 LED 不必要的曝光。报告 qPCR 数据时应遵循 MIQE 指南，并存档原始荧光数据。受监管的实验室应确认软件的访问控制和审计追踪功能。## 如何选择合适的高通量实时荧光定量 PCR 系统（384 孔）？当每日板数量足以证明降低试剂量和采用自动化的合理性时，应选择 384 孔系统。询价时应说明光学均一性、升降温速率、板处理接口、兼容的封板膜和软件导出功能。低通量时 96 孔系统更简单，而绝对定量则更适合数字 PCR。### 与其他分子分析仪器型号相比如何？首先在相对定量和绝对定量之间做出选择：相对定量通常使用实时荧光定量 PCR 即可，而对稀有靶标或微小倍数变化进行绝对定量时，数字 PCR 精密度更好。使孔板规格与通量匹配：96 孔适合常规工作，384 孔适合筛选。根据多重检测需求核对光学通道数，多重检测组合通常需要四到六个通道。为保证重复性，应考虑升降温速率和运行时间、模块均一性以及热盖加热。对于现场或即时检测，电池供电并使用冻干试剂的便携式分析仪更合适。还要核查试剂的开放性、分析和导出软件功能，以及仪器能否支持受监管流程所需的验证文件。