垂直 SDS-PAGE 电泳系统

什么是垂直 SDS-PAGE 电泳系统？垂直 SDS-PAGE 电泳系统在配铂丝电极的缓冲液槽中运行一至两块 1 mm 聚丙烯酰胺凝胶，可分离 10 至 200 kDa 的蛋白质，是蛋白质实验室用于纯度和分子量测定的标准设备。## 概述

该系统由制胶架、构成密封上缓冲液腔的凝胶卡盒组件以及容纳阳极的下槽组成。电极组件可放置一到两套玻璃板夹层，孔道由梳子形成。上、下缓冲液腔之间施加电压，非连续 Tris-甘氨酸缓冲液系统使条带在进入分离胶时变锐。典型条件为恒压 100–200 V 运行 45–90 分钟，每块凝胶预期电流 10–15 mA。可选冷却配置适用于高压或长时间运行，也可在一块凝胶电泳的同时对另一块进行转印。玻璃板和梳子规格支持 10、12 或 15 孔道，也可使用预制胶替代手工制胶。## 工作原理是什么？在 SDS-PAGE 中，样品用十二烷基硫酸钠和还原剂变性，使蛋白质去折叠并获得与其长度成正比的均匀负电荷。施加电场后所有蛋白质向阳极迁移，聚丙烯酰胺筛网使其迁移距离主要取决于分子量。采用浓缩胶与分离胶组成的非连续缓冲液系统，可在分离前把蛋白质浓缩成锐利条带。等电聚焦则利用 pH 梯度按等电点分离蛋白质，在等电点处净电荷为零、迁移停止。双向电泳将两者结合，先按电荷、再按大小分离，可分辨数千个蛋白质斑点。毛细管系统在细毛细管中完成 SDS 或电荷分离，并通过在线吸光度或荧光检测，用定量检测替代染色。## 主要特点有哪些？- 可放置一至两块 1 mm 手工胶或预制胶 - 上缓冲液腔无需额外部件即可密封 - 梳子规格支持 10、12 或 15 个加样孔 - 恒压或恒流运行，最高 200 V - 可选冷却芯，适合高压运行 - 电极组件带颜色标识，防止极性接反

技术参数有哪些？典型的垂直 SDS-PAGE 电泳系统配置：凝胶尺寸为 approx. 80 x 100 mm；凝胶厚度为 0.75–1.5 mm；单轮凝胶数为 1 or 2；加样孔规格为 10, 12 or 15 wells；最高电压为 up to 200 V；最大电流为 up to 200 mA。以上数值代表该产品类别的常见水平，具体配置参数以报价单及随机校准文件为准。## 适用于哪些应用？垂直 SDS-PAGE 电泳系统主要用于光密度法定量蛋白质纯度、依据分子量标准品测定分子量、重组蛋白表达检查、Western 印迹的样品制备。在更广泛的蛋白质电泳类别中，实验室还将其用于蛋白质纯度与分子量测定、重组蛋白表达分析、双向电泳蛋白质组分析。## 适用哪些标准与认证？相关标准与方法包括 USP <1057>、Ph. Eur. 2.2.31、Ph. Eur. 2.2.34、IEC 61010-1、ISO 17025、ISO 15189。本型号的认证候选包括 CE、ISO 9001 manufacturing、IEC 61010-1 safety；每项认证均需针对具体配置在发货前确认，仅提供已实际签发的证书。丙烯酰胺具有神经毒性并可能致癌，因此粉末操作和制胶应在通风橱中进行，或使用即用型预制胶，并必须佩戴手套。缓冲液 pH 和离子强度影响浓缩与分辨效果，工作液应新配且不宜过度重复使用。一致的上样量、还原剂的新鲜程度和加热时间决定条带的锐利程度。凝胶应在推荐电压和电流范围内运行，高压运行时的温度控制很重要，因为焦耳热会使条带变形。用于比较光密度定量的染色与脱色方案应标准化，用于纯度计算的图像应在相机线性范围内采集。应记录凝胶浓度、电泳条件和染色方法以便追溯。## 如何选择合适的垂直 SDS-PAGE 电泳系统？当常规纯度和分子量测定使用 1 mm 标准凝胶、每块凝胶不超过 15 个样品即可满足需求时，应选择垂直 SDS-PAGE 系统。询价时应注明凝胶尺寸与厚度、加样孔规格、电压与电流上限、冷却选项以及预制胶兼容性。### 与其他蛋白质电泳型号相比如何？应首先明确目的。常规纯度和分子量测定使用 1 mm 凝胶、10–15 孔道的垂直 SDS-PAGE 系统即可满足多数需求，成本也低。小型系统可减少缓冲液和样品消耗、运行更快，便于免疫印迹，但对相邻条带的分辨率较低。多通道系统在筛选大量样品时可在同一电泳槽中处理 6 至 12 块凝胶。需要分辨复杂蛋白质组时选择双向电泳，它要求等电聚焦第一维和一致的样品制备。毛细管系统给出数值化的纯度结果，在受监管放行检测、样品量小或需要全自动化的场景更受青睐。还应确认凝胶浓度与梯度选择、最高电压与电流、冷却配置、玻璃板兼容性，以及是否支持预制胶。