MALDI-TOF 微生物鉴定系统

什么是 MALDI-TOF 微生物鉴定系统？MALDI-TOF 微生物鉴定系统测量单个菌落的核糖体蛋白质谱并与参考数据库比对，可在数分钟内给出种水平鉴定，且每个样品的试剂成本较低。## 概述

MALDI-TOF 系统在靶板上将菌落或提取物与基质制成薄膜，然后对每个点位发射激光。被电离的核糖体蛋白经飞行时间管到达检测器，记录到的谱峰模式具有物种特征。软件将谱图与经整理的文库比对，报告最佳匹配及得分。样品制备简单，培养物可用后在数分钟内即可出结果，许多仪器每板可运行 96 个点位。性能取决于数据库覆盖度、培养质量和靶板制备与校准的一致性。文库中未收录的分离株、混合培养或蛋白谱异常的菌株会得到低分，需要辅以其他方法确认。由于过程始于活菌落，生物安全和靶板处理程序十分重要。## 工作原理是什么？微生物鉴定系统通过测量物种特有性质，将未知分离株与参考数据库匹配。生化系统用糖类、氨基酸和显色底物接种微型孔或卡片，并将产生的颜色或浊度模式与储存的图谱比对。MALDI-TOF 仪器用激光电离核糖体蛋白，并将质谱与参考谱对齐。分子系统用实时 PCR 扩增 16S rRNA、23S rRNA 或 ITS 区等保守基因，并将熔解曲线或序列与数据库比对。免疫学系统用乳胶颗粒或标记抗体检测种特异性抗原。每种方法都需要更新的数据库、质控菌株，在受监管使用时还需书面验证。## 主要特点有哪些？- 激光电离配飞行时间质量分析 - 96 点位靶板实现高通量 - 简单的菌落薄膜制备 - 数分钟内给出种水平鉴定 - 经整理质谱数据库并以得分报告

技术参数有哪些？典型的 MALDI-TOF 微生物鉴定系统配置：鉴定原理为 MALDI-TOF mass spectrometry；质量范围为 2,000–20,000 Da；激光为 Nitrogen 337 nm or solid-state 355 nm；靶板容量为 96 spots (48 or 384 optional)；出结果时间为 1–5 min per isolate；数据库覆盖为 Several thousand species and subspecies。以上数值代表该产品类别的常见水平，具体配置参数以报价单及随机校准文件为准。## 适用于哪些应用？MALDI-TOF 微生物鉴定系统主要用于临床微生物诊断、食品和饮料微生物检测、制药环境监测、兽医诊断、微生物分类学研究。在更广泛的微生物鉴定系统类别中，实验室还将其用于临床微生物诊断、食品和饮料微生物检测、制药环境监测。## 适用哪些标准与认证？相关标准与方法包括 CLSI M35、CLSI M45、USP <1113>、ISO 7218、ISO 11133、IEC 61010-1。本型号的认证候选包括 CE-IVD、ISO 13485 manufacturing、IEC 60825-1 laser classification；每项认证均需针对具体配置在发货前确认，仅提供已实际签发的证书。应保持参考数据库更新，因为过时条目会导致对新兴或更名物种的错误鉴定。应按既定周期运行质控菌株并记录结果。质谱仪应遵循制造商的校准要求，并用标准品检查允差。应按相应生物安全级别处理培养物，对仪器表面进行消毒并妥善处理废弃物。在报告之前应针对参考方法验证新检测方法，并规定方法间结果不一致时的处理方式。受监管实验室应通过变更控制管理软件和数据库更新，并确认审计追踪行为。电气安全遵循 IEC 61010-1，激光仪器还应遵循 IEC 60825-1。## 如何选择合适的 MALDI-TOF 微生物鉴定系统？当需要对大量培养分离株进行快速、低成本的鉴定，并能维护仪器及其数据库时，应选择 MALDI-TOF。询价时应说明质量范围、靶板容量、数据库范围和更新政策、鉴定得分阈值、LIS 接口以及服务要求。### 与其他微生物鉴定系统型号相比如何？首先明确需要鉴定的微生物种类和所需的分辨水平。生化鉴定板对常规临床和食品分离株经济实用，在鉴定的同时可进行药敏试验。MALDI-TOF 每个样品试剂成本低、速度快，但需要较大的仪器和良好维护的质谱数据库。当微生物无法培养、需要快速鉴定或需区分亲缘关系很近的种时，分子方法必不可少。免疫学系统用于快速确认可疑物种。还应考虑通量、周转时间、数据库规模及更新政策、每项检测成本、培训、生物安全级别，以及结果是否需要带审计追踪地传入实验室信息系统。