纳米板式数字 PCR 系统

什么是纳米板式数字 PCR 系统？纳米板式数字 PCR 系统将每个样本装入一次性板上数千个固定的纳升级微孔，并在一体化仪器中完成循环与成像。适合希望采用封闭、自动化流程，手工操作时间少且污染风险较低的实验室。## 概述

纳米板系统的分区是微加工形成的微孔，每个样本通常有 8,500 至 26,000 个，并通过油或膜密封，使每个反应相互隔离。加样只需一次移液，一体化仪器完成板的热循环，并用相机在多个波长下对所有孔位成像。固定的孔几何形状使分区体积高度均一，约 0.5–0.9 nL，避免了微滴融合。板可容纳 8、24 或 96 个样本，从加样到出结果约 2–4 小时。提供两至五个颜色通道。其局限是各板规格的分区数固定，单样本耗材成本较高，但流程简单、可追溯，适合常规工作。## 工作原理是什么？数字 PCR 将样品与预混液分割成大量相互独立的反应，形式可以是油包水微滴、板上的纳升级微孔，或芯片上的微腔室。各分区经热循环至终点，荧光读取器将每个分区判定为阳性或阴性。设 λ 为每个分区的平均拷贝数，则阴性分区比例等于 e^−λ，由此可根据阴性计数、分区体积和稀释倍数计算浓度。由于定量依赖计数而非扩增动力学，因此受抑制剂和扩增效率差异的影响较小，在低拷贝数下精度较高。关键部件包括分区单元、热循环仪、多色光学读取器以及带阈值设定的分析软件。## 主要特点有哪些？- 单步加样至固定的纳升级微孔 - 循环与成像在一台仪器内完成 - 分区体积均一，无微滴融合 - 提供 8、24 或 96 样本规格的板 - 两至五个颜色通道，支持多重检测 - 审计追踪与用户管理选项

技术参数有哪些？典型的纳米板式数字 PCR 系统配置：分区类型为 fixed nanoliter wells；每样本分区数为 8,500–26,000；分区体积为 0.5–0.9 nL；反应体积为 10–40 µL；检测通道为 2 to 5；动态范围为 about 5 logs。以上数值代表该产品类别的常见水平，具体配置参数以报价单及随机校准文件为准。## 适用于哪些应用？纳米板式数字 PCR 系统主要用于临床研究检测、残留病监测、细胞与基因治疗载体滴度、环境 DNA 定量。在更广泛的数字 PCR 仪类别中，实验室还将其用于稀有突变与液体活检检测、病毒载量绝对定量、拷贝数变异分析。## 适用哪些标准与认证？相关标准与方法包括 ISO 20395、ISO 22174、CLSI MM19、dMIQE guidelines (research reporting)、IEC 61010-1、IEC 61010-2-101。本型号的认证候选包括 CE、ISO 9001 manufacturing；每项认证均需针对具体配置在发货前确认，仅提供已实际签发的证书。应将系统放在稳固的台面上，并把样品准备、分区和扩增后处理步骤分隔在不同区域，以限制扩增产物污染。使用供应商指定的耗材和油，装载微滴或板时避免产生气泡。每次运行均应包含无模板对照和阳性对照，并一致地设置荧光阈值。安装时及此后定期使用标准物质验证分区体积和光学性能。微滴生成仪和读取器需要日常清洁并检查卡盒。若结果用于临床或受监管的决策，应规划软件验证、数据留存与审计追踪，并确定每个样本可接受的分区数范围。## 如何选择合适的纳米板式数字 PCR 系统？当流程简便、可追溯性和低污染风险比耗材成本更重要时，可选择纳米板系统。它比微滴规格更适合常规使用，但某些板型的分区数较少。询价时应说明板型、每样本分区数、通道数、每批样本数、出结果时间、软件验证与数据完整性功能，以及耗材供货周期。### 与其他数字 PCR 仪型号相比如何？决定性参数是分区数量与体积（决定动态范围和精度）以及荧光颜色数（决定多重能力）。微滴系统以相对较低的耗材成本提供高分区数；纳米板与芯片规格流程更简单、更自动化，污染风险也更低。应考虑样本通量、手工操作时间，以及分区、循环和读取是集成在一台设备还是分开的多台设备中。核查软件是否支持稀有事件判读、拷贝数变异分析与泊松置信区间。对于临床或标准物质工作，应询问耗材批次可追溯性以及 dMIQE 建议等验证指南。同时需考虑单样本耗材成本，其通常高于 qPCR。